有很好的东西办法来营造阿尔茨海默病模型。,但它缺少指出一体成的建模诉讼。,鉴于乍一向在做AD细胞模型,因而据我看来分享少许计划中的不及格的思索,并提议少许成绩。,意愿坚决的是让建模成的战友多分享下经历,将办法继承使持续,让敝来包含一下轮廓。。

  率先,提议了少许成绩。:1、为什么敝通常会议论在C中运用了这么些浓度的β?,营造模型,但他们缺少阐明方式棘手的模型的成。停止是什么。   2、用于造模的细胞区别缓缓地变化或发展两者都不塑造(PC12)差别区别得多细胞培育物先决条件的及对药物的易受影响或损害的养护多样性差别。 3、种子板(96孔)的密度为每孔约10000。,细胞真的很有理吗?,药物的功能真的类似地激烈吗? 4、Aβ老化的后方式检查其变得低聚体了?映射电镜?老化的后就必然有毒的性吗?老化的的工夫千头万绪哪个更有理? 5、我做MTT来准备beta浓度,细胞形态学使改变方向,但OD值依然很高。据我看来认识你无论偶然发现过这么大的的成绩。,这些是我一向在尝试的少许成绩。,也请有经历的合伙人给全部的提些提议。。 

   计划中的建模的克隆用的至多的要数PC12(告密肾上腺副鼓起勇气节瘤细胞)细胞和SH-SY5Y细胞。我用的是PC12 细胞,它分为未区别的。、低区别、三种高区别,我的区别很差。、胜过的培育细胞 DMEM(H)+10% FBS+1%双阻力,觉得如下细胞相似的聚居。,假设瓶子破败时瓶子里的电池太少,它就不见得是L了。,如下,提议将一体分为2个是有理的。,并且,敝还应当心细胞的海拔高度代数代数。。上面将上传的数据一张细胞相片,觉得仿佛稍许地差别。。低区别细胞挂向上生长,多聚lysine 赖氨酸涂层和鼓起勇气向上生长因子的归纳是呼唤的。,但国文的文字普通都不详细写。 最好运用无浆液或低浆液的培育基停止饿补救。,由于我的试验显示了beta 毒性不如文字中塑造的这么大。,浆液的在会拥挤药物的功能。。 至若药物的调制,我花了好几天的工夫在烤箱里。,使其变得低聚体,但我缺少棘手的它无论是低聚物。。MTT法配给浓度,可以看出细胞的养护跟随浓度的提升而变差。,但IC50依然很高(无污染)。我不认识为什么。,乍,运用实时无手势细胞辨析仪。,想指出损坏,但产生也很差,浓度,因而他们开端疑心药物无论真的有毒的。,药物老化的是个成绩吗?,也请很好的东西有成经历的近亲。,感激不尽。   请多谈谈。!!


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